荧光PCR扩增仪（荧光定量PCR仪）的操作流程主要包括实验前准备、实验操作及实验后处理，同时也有相应的注意事项。以下是对操作流程与注意事项的详细指南：

　　一、操作流程

　　1.实验前准备

　　试剂和设备准备：准备PCR试剂盒、引物、模板DNA或RNA样品、荧光PCR扩增仪等，并确保所有试剂和设备的质量良好。

　　PCR反应体系设计：根据实验需要，设计合理的PCR反应体系，包括引物浓度、模板DNA或RNA浓度、试剂盒成分等。

　　实验程序设计：根据PCR试剂盒和目标分子的特性，设置好PCR反应的温度、时间和循环次数等条件。

　　2.实验操作

　　开启仪器：启动荧光PCR扩增仪及其相连的电脑。

　　放入样品：点击PCR仪上的“Eject”按钮，放入已离心过的样品管（如八连管），再缓慢关闭接样台。

　　选择或编辑程序：在电脑上打开与PCR扩增仪配套的软件，找到对应的实验程序文件夹。根据实验需求，选择或编辑相应的程序，并确保所放样品的地址以及信息准确无误。编辑完成后，保存程序并传出到PCR扩增仪上。

　　运行程序：在PCR扩增仪上选中要运行的程序，点击“Start”开始工作。

　　实时监控：实验过程中，密切监控荧光信号的变化情况，确保实验顺利进行。

　　3.实验后处理

　　数据读取与分析：待PCR实验结束后，通过软件将实验结果从荧光PCR扩增仪传入电脑，并使用软件内置的分析工具对实验结果进行分析，得出目标分子的含量等信息。

　　取出样品：点击PCR仪上的“Eject”按钮取出样品管。

　　仪器清理与消毒：对实验台面和仪器进行清理和消毒工作。
 

　　二、注意事项

　　试剂准备与储存：试剂应新鲜且储存条件符合要求，避免污染和交叉污染。使用一次性移液器枪头和吸头，不同实验的试剂应分开存放并标记清楚。

　　加样操作：加样过程中，应注意移液器的使用方法和技巧，确保量程合适并校准准确。加样时应保持移液器垂直并缓慢吸取液体，避免产生气泡和误差。对于粘稠度较高的试剂，应注意取液时不可深入液体太多。

　　程序编辑与核对：在编辑实验程序时，应注意核对所放样品的地址和信息，确保准确无误。同时可以根据实验需求对程序进行个性化设置和优化。

　　仪器保养与维护：定期对仪器进行清洁和消毒，避免污染和交叉污染。同时定期对仪器进行校准和检修，确保其性能稳定可靠。

　　实验室管理：实验室应实行严格的分区管理制度，将试剂准备间、样本处理间、PCR室等明确区分开来。实验人员应尽量减少在实验室内频繁走动，尤其是去过电泳间之后不可立即进入其他房间。

　　安全操作：在使用过程中注意仪器的安全操作，避免发生意外事故。如有保险丝损坏等情况，应按说明书要求操作更换。

　　荧光PCR扩增仪的操作需要严格遵守操作流程和注意事项，以确保实验结果的准确性和可靠性。